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          ELISA試劑盒不同類型樣本的處理方法
          更新時間:2018-04-20   點擊次數(shù):1349次

          在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,應(yīng)該在-70℃凍存?zhèn)溆谩;馍锾嵝眩瑯?biāo)本應(yīng)避免反復(fù)凍融。
          液體類標(biāo)本: 包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
          1. 細胞培養(yǎng)上清:
          檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
          2. 培養(yǎng)細胞
          檢測細胞內(nèi)的成份時,用pbs(ph7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          3. 組織標(biāo)本
          切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的pbs,ph7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的pbs(ph7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
          4. 血清:
          室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          5. 血漿:
          應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇edta、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
          6. 尿液:
          用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
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