常有ELISA試劑盒操作者抱怨試驗復雜，而經驗豐富的教師們會覺得很簡潔，一是熟能生巧，二是把握了其間的隱秘。

ELISA隱秘要害之洗刷：

洗刷在ELISA試劑盒進程中不是反應聚，但卻是決議試驗勝敗的要害。洗刷的目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或抗體結合的物質以及在反應進程中非特異性吸附于固相載體的煩擾物質。

洗刷如不*，特別在zui后一次，如有酶結合物的非特異性吸附，將使空白值升高。別的，在間接法中如血清標本內的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈，也將與酶標抗體效果而發生煩擾。

ELISA隱秘要害之加樣：

在ELISA試劑盒中除了包被外，一般需進行45加樣。在定性測定中有時不強調加樣量的性，此時應該運用相同口徑的滴管，保持的加樣姿勢，使每滴液體的體積底子相同。

在定量測定中則加樣量應力求。標本和結合物的稀釋液應按規則制造。加樣時應將液體加在孔底，防止加在孔壁上部，并留意不行呈現氣泡。