技術文章您現在的位置:首頁 > 技術文章 > 上海晶抗生物就流式細胞術常見樣本的制備與保存詳細分解
          上海晶抗生物就流式細胞術常見樣本的制備與保存詳細分解
          更新時間:2023-06-08   點擊次數:1288次

          流式細胞術是當代細胞分析技術之一,包括細胞計數、細胞內/外抗原分子檢測、細胞中DNA和RNA的倍體分析、細胞的生物學特性及功能分析等。

          對于流式細胞分析而言,樣本制備的好壞對終的檢測結果有很大的影響。在免疫學和血液學中,應用流式細胞術分析的樣本多為外周血、骨髓、各類體液(如腦脊液、胸水、腹水)以及人體的組織(如淋巴結、脾、肝等),這幾種樣本要如何制備和保存呢? 



          外周血骨髓保存方法

          收集樣本后置于加有抗凝劑(一般選擇肝素或EDTA)的試管中,室溫保存,盡量在12 h內處理樣本;若無法及時處理,4℃保存,此時好選擇肝素抗凝管。


          外周血骨髓處理步驟

          一般不需要特殊處理制備單細胞懸液,所用試劑為淋巴細胞分離液和紅細胞裂解液。但在臨床檢測中,為了避免細胞成分丟失,通常不推薦使用淋巴細胞分離液分離單核細胞。


          外周血骨髓怎樣選擇抗凝劑

          血液標本可以使用EDTA、ACD(枸櫞酸葡萄糖)或肝素抗凝。一般認為,ACD和肝素抗凝的樣本72 h內細胞是穩定的;EDTA抗凝48 h內是穩定的。EDTA適用于白細胞的免疫表型分析,可防止成熟的髓系細胞貼壁造成細胞損失,并具有較強的抗血小板凝集能力,但對細胞活性的保持不如肝素抗凝。同時EDTA是二價陽離子的強螯合劑,會影響Ca2+相關的抗原位點(如CD11b等),并會抑制與Ca2+ 相關的細胞功能。肝素常用于白細胞功能研究,可維持Ca2+Mg2+在細胞內的生理濃度,更好保持細胞活性,適用于放置時間較長、不能及時檢測的樣本,但不適合血小板的相關檢測,骨髓樣本優先選擇肝素抗凝。


          體液保存方法

          收集樣本后置于肝素抗凝管中,室溫保存,且盡量在12 h內處理樣本。若無法及時處理,則4℃保存,時間好不超過48 h。


          體液處理方法

          樣本1000-1500 rpm離心5 min,棄去上清;加入含有0.1%牛血清白蛋白的磷酸鹽緩沖液(PBS),離心洗滌5 min;

          加入適量PBS重懸。如有細小沉淀,用300目尼龍網過濾后備用。


          組織保存方法

          切取新鮮組織樣本置于生理鹽水或PBS中,室溫保存,盡量在12 h內處理樣本;若無法及時處理,4℃保存,保存時間好不要超過48 h。不建議用甲醛、乙醇固定細胞,不要用酶、表面活性劑處理細胞。


          組織處理方法

          流式細胞術常用的組織樣本制備單細胞懸液方法有:機械法、酶處理法、化學試劑處理法及表面活性劑處理法,在流式分析中,為保持抗原活性,多采用機械法處理樣本。采用機械法需注意動作輕柔,盡量減少細胞的損傷。

          上海晶抗生物工程有限公司
          • 網站首頁
          • 關于我們
          • 新聞動態
          • 產品中心
          • 技術文章
          • 榮譽資質
          • 在線留言
          • 聯系我們

          上海晶抗生物工程有限公司

          地址:上海市金山工業區亭衛公路6558號9幢2441室

          版權所有:上海晶抗生物工程有限公司  備案號:滬ICP備16026504號-5  總訪問量:651816  站點地圖  技術支持:智慧城市網  管理登陸

          主站蜘蛛池模板: 无码人妻精品一区二区蜜桃网站| 精品国产一区二区三区在线观看 | 日韩社区一区二区三区| 国产福利一区视频| 秋霞无码一区二区| 无码国产精品一区二区免费vr | 精品视频一区二区三区在线观看 | 天堂成人一区二区三区| 日韩精品中文字幕无码一区| 国产在线视频一区二区三区98| 国产av一区二区精品久久凹凸| 天堂一区二区三区精品| 性色av无码免费一区二区三区| 精品三级AV无码一区| 国产成人一区二区三区精品久久| 少妇激情av一区二区| 日本成人一区二区三区| 韩国福利一区二区三区高清视频| 香蕉在线精品一区二区| 一区二区三区无码高清| 精品免费久久久久国产一区| 亚洲AV日韩精品一区二区三区| 日亚毛片免费乱码不卡一区| 人妻无码一区二区视频| 午夜精品一区二区三区在线观看| 国产乱码精品一区二区三区四川| 国产一区二区三区在线免费| 天堂不卡一区二区视频在线观看| 极品少妇伦理一区二区| 中文字幕一区二区日产乱码| 真实国产乱子伦精品一区二区三区| 国产AV国片精品一区二区| 制服丝袜一区二区三区| 中文字幕精品一区影音先锋| 在线欧美精品一区二区三区| 国产日韩精品一区二区三区 | 福利一区二区在线| 久久国产高清一区二区三区| 国产精品免费一区二区三区四区| 精品一区二区三区在线播放视频| 亚洲av无码一区二区三区天堂|