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          現(xiàn)貨人醛固酮ELISA 檢測試劑盒
          更新時間:2013-06-24   點擊次數(shù):2183次

                      本試劑僅供研究使用 標本:血清或血漿

          人醛固酮ELISA 檢測試劑盒
          試驗原理:
              ALD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知ALD濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將ALD和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中ALD的濃度呈比例關(guān)系。
                      
          自備材料
          蒸餾水。
          加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
          振蕩器及磁力攪拌器等。

          安全性
          避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
          實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
          不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

          操作注意事項
          試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
          實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
          不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
          使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
          使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
          洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
          底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
          加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
          按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

          人醛固酮ELISA 檢測試劑盒
          樣品收集、處理及保存方法
          血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
          血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
          細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
          保存------如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          試劑的準備
          標準品:標準品的系列稀釋應(yīng)在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。

          洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

          操作步驟
          使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
          根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
          加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
          甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
          甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
          每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
          取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
          在450nm波長處測定各孔的OD值。

          人醛固酮ELISA 檢測試劑盒
          局限
          6號標準品以上的結(jié)果為非線性的,根據(jù)此標準曲線無法得到的結(jié)果。

          試劑盒性能
          1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。
          2. 特異性:不與其它細胞因子反應(yīng)。
          3. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。

          人醛固酮ELISA 檢測試劑盒
          結(jié) 果 判 斷 與 分 析
          1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

          2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應(yīng)的ALD標準品濃度為橫坐標(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的ALD含量可根據(jù)其OD值由標準曲線換算出相應(yīng)的濃度。

          3、檢測值范圍:0-800pg/ml

          4、敏感度: 1.0 pg/ml
          RC017-2ug Recombinant Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor (rHu GM-CSF) 重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子 2ug
          RC018-2ug Recombinant Human Thrombopoietin ( rHuTPO ) 重組人血小板生成素 2ug
          RC019-2ug Recombinant Human Thymic Stromal Lymphopoietin ( rHu TSLP ) 重組人胸腺基質(zhì)淋巴生成素 2ug
          RC020-5ug Recombinant Human Pigment Epithelium-derived Factor( rHuPEDF ) 重組人色素上皮細胞衍生因子 5ug
          RC021-10ug Recombinant Human Tumor Necrosis Factor-alpha ( rHuTNF-α) 重組人腫瘤壞死因子α 10ug
          RC022-5ug Recombinant Human B Cell Activating Factor ( rHuBLys ) 重組人B淋巴細胞刺激因子 5ug
          RC023-10ug Recombinant Human BAFF Receptor(rHuBAFF-R) 重組人B淋巴細胞刺激因子-受體 10ug
          RC024-2ug Recombinant Human Flt-3 Ligand (rHuFlt-3L) 重組人Flt3配體 2ug
          RC025-10ug Recombinant Human soluble CD40 Ligand (rHusCD40L) 重組人可溶性CD40配體 10ug
          RC026-2ug Recombinant Human Oncostatin M(rHuOSM) 重組人腫瘤抑制素 2ug
           

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