目前有許多TLR的抑制劑被開(kāi)發(fā)出來(lái)，但是都沒(méi)有獲得批準(zhǔn)，因此，要想治療這一類疾病，就必須對(duì)TLR2的信號(hào)傳遞機(jī)制做更深入的研究。
首先，作者利用計(jì)算機(jī)輔助的方法，針對(duì)BB loop區(qū)刪選了所有可能插入的小分子化合物以及已經(jīng)上市的藥物。他們篩選到了1000多種有可能會(huì)該區(qū)域發(fā)生互作的潛在分子，其中有149種小分子化合物以及20種上市藥物具有的TLR-2信號(hào)阻斷活性。
之后，作者將篩選到的化合物進(jìn)行體外試驗(yàn)。這些藥物分別與轉(zhuǎn)染了TLR-2的HEK293細(xì)胞進(jìn)行孵育，隨后細(xì)胞經(jīng)過(guò)TLR2配體的刺激并檢測(cè)下游的IL-8的表達(dá)。結(jié)果顯示，第C29號(hào)化合物能夠有效地抑制配體引起的HEK293細(xì)胞IL-18的分泌。隨后，作者在人源的單核細(xì)胞系THP-1中驗(yàn)證了上述結(jié)果。接下來(lái)，作者檢測(cè)了該藥物對(duì)小鼠的TLR-2信號(hào)的阻斷效應(yīng)。結(jié)果顯示，C29能夠有效地抑制TLR-1/2的信號(hào)傳遞，但不能抑制TLR2/6的信號(hào)傳遞。
另外，作者還發(fā)現(xiàn)該藥物還能夠抑制微生物本身引起的TLR2的信號(hào)傳遞。
隨后，作者通過(guò)生化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)C29能夠抑制TLR-2激活后與下游MyD88的相互作用。并且C29能夠抑制MAPK p38以及ERK的磷酸化。
那么C29是否是特異性針對(duì)BB-loop區(qū)的多肽序列呢？作者設(shè)計(jì)了一系列BB-loop突變?cè)囼?yàn)，不幸的是，這些突變本身就會(huì)使得TLR-1/2的信號(hào)失活，因此無(wú)法通過(guò)這一手段證明C29的特異性。不過(guò)至少這一實(shí)驗(yàn)證明了BB LOOP區(qū)結(jié)構(gòu)對(duì)于TLR-1/2的信號(hào)傳遞是至關(guān)重要的。
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