PUC18質粒

PUC18質粒 

其他中文名稱 ： PUC18

級 別 ： BR

保 存 ： -20℃

濃 度 ： 450ug/ml

性 狀 ： 液體或粉末。pUC18是適合于雙脫氧法DNA測序的載體，通常運用于重組dna的分子克隆中，首先我們制備大腸桿菌的感受態細胞（能接受外來重組的dna），這種感受態菌株必須不同外來DNA分子發生遺傳重組，通常是rec基因缺陷型的突變體，同時它們必須是限制系統缺陷或限制與修飾系統均缺陷的菌株，即具有具有這三種缺陷（rk mk rec ），同時對氨芐青-霉素敏感（ap）。puc18載體自身帶有抗氨芐青-霉素基因，而外源片段不具有，這樣只有帶有puc18的轉化子的菌株才能在氨芐青-霉素平板上存活，而外源片段自身環化的不能存活，這稱為抗性篩選。pUC18 上帶有β-半乳糖苷酶基因(lacZ)的調控序列和β-半乳糖苷酶N 端146 個氨基酸的編碼序列，在這個編碼區中插有一個多克隆位點，且不影響正常功能，DH5α感受態菌株帶有β-半乳糖苷酶C 端部分序列的編碼信息，當puc18載體在正常情況下同感受態菌株融合后，互補表達具有酶活性的蛋白質，稱為α-互補現象，當有外源片段插入多克隆位點后，互補現象消失，其形成的菌株顏色具有很大的差異，很容易鑒別，這種篩選方法稱為α-互補現象篩選。由上可見，puc18載體除了能重組導入外源片段外，在篩選表達過程中還具有重要的作用

用 途 ： 生化研究。克隆外源基因。利用lac promoter進行基因表達。使用M13 primers進行DNA測序。